一.RAPD技術(shù)簡(jiǎn)介

運(yùn)用隨機(jī)引物擴(kuò)增尋找多態(tài)性DNA片段可作為分子標(biāo)記。這種方法即為RAPD(RandomamplifiedpolymorphicDNA，隨機(jī)擴(kuò)增的多態(tài)性DNA)。盡管RAPD技術(shù)誕生的時(shí)間很短，但由于其獨(dú)特的檢測(cè)DNA多態(tài)性的方式以及快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，使這個(gè)技術(shù)已滲透于基因組研究的各個(gè)方面。

RAPD技術(shù)建立于PCR技術(shù)基礎(chǔ)上，它是利用一系列(通常數(shù)百個(gè))不同的隨機(jī)排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為10聚體)為引物，對(duì)所研究基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。聚丙烯酰胺或瓊脂糖電泳分離，經(jīng)EB染色或放射性自顯影來(lái)檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物DNA片段的多態(tài)性，這些擴(kuò)增產(chǎn)物DNA片段的多態(tài)性反映了基因組相應(yīng)區(qū)域的DNA多態(tài)性。

二.RAPD技術(shù)流程：

三.客戶(hù)提供：

★ 基因組DNA：

●至少15μL樣品，濃度為50-100ng/μL;

●2%瓊脂糖電泳檢測(cè)有DNA主帶，沒(méi)有降解;

●DNA經(jīng)過(guò)DNA純化試劑盒或磁珠純化;

●DNA需溶解在TE或滅菌的去離子水里;

●DNA溶解后，肉眼看不到雜色;

★ 植物材料： 新鮮組織，葉片采用硅膠干燥后或干冰運(yùn)輸;

★ 動(dòng)物材料： 新鮮組織，無(wú)水乙醇封存低溫運(yùn)輸;